<html>
<head>
<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=utf-8">
</head>
<body style="word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; -webkit-line-break: after-white-space;" class="">
<div class="">
<div style="border-style: solid none none; border-top-color: rgb(225, 225, 225); border-top-width: 1pt; padding: 3pt 0cm 0cm;" class="">
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<b class=""><span lang="EN-US" class="">From:</span></b><span lang="EN-US" class=""> Alexandrov, Yuriy <br class="">
<b class="">Sent:</b> 20 February 2018 17:42<br class="">
<span style="font-size: 11pt;" class=""> </span></span></div>
</div>
</div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">Dear Paul,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class=""> </span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">We think you are right – this is brightness-( or “amplitude”-) weighted tau.<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class=""> </span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">More specifically, it is calculated as<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif; text-indent: 36pt;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class="">w_mean_tau</span><span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">  = sum(I0.*tau)/sum(I0)<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">where I0 is the pre-exponential factor, tau is the lifetime (both images certainly), the (.*) operator is pixel-wise multiplication, and summation is over all fitted pixels.<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class=""> </span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">Sean may correct or comment on that (he actually implemented this calculation), - but IMO this interpretation is realistic.<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class=""> </span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">Best,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class="">Y. <o:p class=""></o:p></span></div>
<p class="MsoNormal" style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class=""> </span></p>
<div>
<blockquote type="cite" class="">
<div class="">On 19 Feb 2018, at 15:10, Paul Thomas (SCI - Staff) via FLIMfit-users <<a href="mailto:flimfit-users@lists.openmicroscopy.org.uk" class="">flimfit-users@lists.openmicroscopy.org.uk</a>> wrote:</div>
<br class="Apple-interchange-newline">
<div class="">
<div class="WordSection1" style="page: WordSection1; font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px;">
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class="">Hello,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class=""><o:p class=""> </o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class="">I’m using FLIMfit to fit bi-exponential decay curves to TCSPC data in FRET experiments. I’ve seen discussions that suggest using the “amplitude-weighted” average tau for such experiments. Is this the
 value designated “w_mean_tau” in the Parameters list of FLIMfit?<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class=""><o:p class=""> </o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class="">Thanks,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class="">Paul.<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">__________________________________________<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Dr. Paul Thomas FRMS FPhysiol, Manager,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">The Henry Wellcome Laboratory for Cell Imaging,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Faculty of Science,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">University of East Anglia,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Norwich Research Park,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Norwich,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">NR4 7TJ,<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">United Kingdom.<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">e-mail:<span class="Apple-converted-space"> </span><a href="mailto:p.thomas@uea.ac.uk" style="color: rgb(149, 79, 114); text-decoration: underline;" class=""><span style="color: blue;" class="">p.thomas@uea.ac.uk</span></a><o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Tel: +44-1603-592196<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Fax: +44-1603-592250<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Imaging web-site:<span class="Apple-converted-space"> </span><a href="https://www.uea.ac.uk/biological-sciences/research/facilities/henry-wellcome-lab" style="color: rgb(149, 79, 114); text-decoration: underline;" class=""><span style="color: blue;" class="">https://www.uea.ac.uk/biological-sciences/research/facilities/henry-wellcome-lab</span></a><o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-family: 'Book Antiqua', serif; color: rgb(68, 84, 106);" class="">Personal web-page:<span class="Apple-converted-space"> </span><a href="https://www.uea.ac.uk/biological-sciences/research/facilities/henry-wellcome-lab/people" style="color: rgb(149, 79, 114); text-decoration: underline;" class=""><span style="color: blue;" class="">https://www.uea.ac.uk/biological-sciences/research/facilities/henry-wellcome-lab/people</span></a></span><span style="font-family: 'Book Antiqua', serif;" class=""><o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif;" class=""><o:p class=""> </o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="color: rgb(31, 73, 125);" class=""><o:p class=""> </o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif;" class=""><br class="">
</span><span style="font-family: Arial, sans-serif;" class=""><span id="cid:image001.png@01D3A993.D139D030"><image001.png></span></span><span style="" class=""><o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<b class=""><span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(31, 73, 125);" class=""><o:p class=""> </o:p></span></b></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<b class=""><span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(31, 73, 125);" class="">Gold (</span></b><span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(31, 73, 125);" class="">Teaching Excellence Framework 2017)<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<b class=""><span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(31, 73, 125);" class="">UK Top 15<span class="Apple-converted-space"> </span></span></b><span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(31, 73, 125);" class="">(The
 Times/Sunday Times 2018 and Complete University Guide 2018)<o:p class=""></o:p></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<b class=""><span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(31, 73, 125);" class="">World Top 200<span class="Apple-converted-space"> </span></span></b><span style="font-size: 9pt; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(31, 73, 125);" class="">(Times
 Higher Education World University Rankings 2017)<b class=""><o:p class=""></o:p></b></span></div>
<div style="margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 11pt; font-family: Calibri, sans-serif;" class="">
<o:p class=""> </o:p></div>
</div>
<span style="font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px; float: none; display: inline !important;" class="">_______________________________________________</span><br style="font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px;" class="">
<span style="font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px; float: none; display: inline !important;" class="">FLIMfit-users
 mailing list</span><br style="font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px;" class="">
<a href="mailto:FLIMfit-users@lists.openmicroscopy.org.uk" style="color: rgb(149, 79, 114); text-decoration: underline; font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px;" class="">FLIMfit-users@lists.openmicroscopy.org.uk</a><br style="font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px;" class="">
<a href="http://lists.openmicroscopy.org.uk/mailman/listinfo/flimfit-users" style="color: rgb(149, 79, 114); text-decoration: underline; font-family: Helvetica; font-size: 13px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; orphans: auto; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: auto; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px;" class="">http://lists.openmicroscopy.org.uk/mailman/listinfo/flimfit-users</a></div>
</blockquote>
</div>
<br class="">
</body>
</html>